一、操作步驟
1.組織 4℃ 條件下從醫(yi)院取(qu)回。
2.消毒取樣的 15ml 管(guan)，取出組(zu)織，放到(dao) 10ml 大皿中。
3.用含(han) 4 抗的(de) PBS 溶液浸泡，清洗(xi)組織。
4.再用組織緩沖液浸泡、清洗三遍。
5.將組織剪成 1mm3 大小的組織塊，轉移到 15ml 管中消化。
6.在 37℃ 水浴鍋中，消化 15min。
7.取少(shao)(shao)量液體在(zai)顯微(wei)鏡下觀(guan)察(cha)，看到較(jiao)多的單細胞(bao)和較(jiao)少(shao)(shao)的細胞(bao)簇后(hou)，終止消化(hua)。
8.用 100μm 篩(shai)過濾，然后 300g4℃ 離心(xin) 5min，移去上清。
9.重懸沉淀(dian)，轉(zhuan)移(yi)(yi)到 2ml 離心管中，300g4℃ 離心 5min，移(yi)(yi)去上清。
10.估算沉淀(dian)的細(xi)胞量，以 1:25 的比例添加基質(zhi)膠(jiao)，重懸。
11.24 孔(kong)板鋪板，冰上操作(zuo)，每孔(kong)點膠(jiao) 25ul。
12.鋪板后(hou)，放到 37℃ 細(xi)胞培養(yang)箱中(zhong) 15min 成膠。
13.然(ran)后每孔添加 600ul 結直(zhi)腸癌類器官(guan)培(pei)養基，放到 37℃ 細胞培(pei)養箱中。
二、結果展示
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